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¿Qué son los extremos romos?
Los extremos generados por el corte pueden ser «romos», es decir, que los extremos no tienen bases desapareadas. También, los sitios de corte pueden generar extremos cohesivos o escalonados, que contienen bases desapareadas.
¿Qué son Cortés romos y cohesivos?
Los extremos cohesivos son generados cuando la enzima corta las dos hebras asimétricamente, dejando los extremos de cada hebra de simple cadena complementarios entre sí. Por otro lado, los extremos romos son generados cuando la enzima corta las dos hebras por el mismo lugar, generando dos extremos doble cadena.
¿Cuáles son las funciones de las enzimas de restricción en el organismo?
Una enzima de restricción es una enzima aislada de una bacteria que corta la molécula de ADN en secuencias específicas. El aislamiento de estas enzimas es fundamental para el desarrollo de la tecnología de ADN recombinante (ADNr) y la ingeniería genética.
¿Qué significa PstI?
PstI es una enzima de restricción de tipo II (EC 3.1.21.4) producida por el microorganismo Providencia stuartii que posee una diana de restricción en el ADN de cadena doble dependiente de una secuencia no metilada, palindrómica y asimétrica, sobre la cual su actividad catalítica hidrolasa genera extremos cohesivos.
¿Qué enzimas generan extremos romos?
Las enzimas encargadas de unir los extremos de ambas cadenas se denominan ligasas (Figura 2). Figura 1. Las enzimas de restricción reconocen secuencias de 4, 6 o más bases y cortan generando extremos romos o extremos cohesivos.
¿Qué enzima de restricción corta en extremos romos?
La enzima de Restricción EcoRV digiere el fragmento de ADN en un sitio de restricción. 2. El fragmento de ADN digerido no tiene salientes (extremos romos).
¿Cómo se clasifican las enzimas de restricción?
Las diversas enzimas de restricción se agrupan en tres familias, de acuerdo con sus propiedades: Tipo I, Tipo II y Tipo III. Nos centraremos en el estudio de las enzimas de Tipo II pues, al cortar en un punto muy definido dentro de su secuencia diana, son utilizadas como herramientas en ingeniería genética.
¿Qué es la ligasa T4 y qué función cumplen?
La ADN T4 ligasa cataliza la formación de un enlace fosfodiéster entre el fosfato del extremo 5 y el hidroxilo del extremo 3 yuxtapuestos en ADN o ARN bicatenarios.